亚洲欧美日本国产专区一区-欧美视频在线一级黄片-中文字幕区av一区二区三区-日韩人妻一区二区三区av

新聞中心您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 新聞中心 > 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)ELLSA試劑盒—雙抗體夾心法
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)ELLSA試劑盒—雙抗體夾心法
更新時(shí)間:2013-08-20   點(diǎn)擊次數(shù):2440次

一、原理

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELLSA試劑盒是一種固相酶免疫測(cè)定的方法,目前廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體的檢測(cè)。其基本原理是將抗原或抗體固定在固相載體表面,并保持其免疫活性,再與酶標(biāo)記抗體或抗原聯(lián)結(jié),并保留酶的活性,然后加入酶反應(yīng)的底物,后者被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,反應(yīng)顏色的深淺可與相應(yīng)抗原或抗體的量相關(guān)。在本實(shí)驗(yàn)中,(1)用已知抗體包被固相載體;(2)加入受檢的標(biāo)本(含待測(cè)抗原),使抗原與固相上的抗體結(jié)合;(3)加入以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的已知抗體,使之與抗原結(jié)合。標(biāo)記的酶可催化底物(四甲基聯(lián)苯胺)起顯色反應(yīng),從而指示特異性抗原抗體反應(yīng)的存在。


二、器材與試劑

器材:

(1)50~250μl可調(diào)微量移液器與移液頭(2)37℃培養(yǎng)箱、搪瓷盒(3)酶標(biāo)架(4)洗瓶(含洗滌液)、吸水毛巾(5)酶標(biāo)檢測(cè)儀

試劑:

(1)已包被抗體的酶標(biāo)條(2)400μg/L抗原溶液(3)抗原稀釋液(4)待測(cè)標(biāo)本1、2(5)酶標(biāo)抗體(6)洗滌液(pH7.2 PBS-Tween 20)(7)底物A、B溶液(8)終止液


三、操作步驟

ELLSA試劑盒取已包被抗體的酶標(biāo)板,分別在第1~6孔各加入抗原稀釋液100 ul,第6、7孔各加入400μg/L抗原溶液100 ul,從第6~2孔進(jìn)行對(duì)倍稀釋?zhuān)▃ui后在第2孔吸出的100 ul棄去);在第8、9孔各加入100 ul待測(cè)標(biāo)本1;在第10、11孔各加入100 ul待測(cè)標(biāo)本2。置酶標(biāo)板于37℃,保溫30分鐘。

棄去孔內(nèi)液體,以洗滌液注滿(mǎn)孔內(nèi),置3分鐘后甩干孔內(nèi)液體,重復(fù)3遍。上述孔內(nèi)再加入酶標(biāo)抗體100ul。置37℃,保溫30分鐘。

棄去孔內(nèi)液體,以洗滌液注滿(mǎn)孔內(nèi),置3分鐘后甩干孔內(nèi)液體,重復(fù)4遍。

各孔均加底物A和底物B溶液各100ul,混勻。置37℃,10分鐘左右加入終止液50ul 中止反應(yīng)。

將酶標(biāo)板置酶標(biāo)儀上比色,以第1孔調(diào)零,在450nm波長(zhǎng)處讀取光密度值(O.D值)。

結(jié)果判斷:以O(shè).D值為縱坐標(biāo),抗原標(biāo)準(zhǔn)濃度(0;12.5;25;50;100;200;400μg/L)為橫坐標(biāo)在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),再根據(jù)樣品的平均O.D值在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查出各自的含量。


四、ELLSA試劑盒操作注意事項(xiàng)

正確掌握微量移液器的使用方法:吸液時(shí)將按鈕按至*止點(diǎn),排液時(shí)則應(yīng)盡力按足按鈕(至第二止點(diǎn))。

酶標(biāo)板的正確洗滌:加洗滌液時(shí)應(yīng)小心,勿使洗滌液溢出,流入周?chē)字?,造成交叉污染。洗滌后?yīng)盡量甩干孔內(nèi)殘液。洗滌液加入孔后,須保持三分鐘再棄去。

注意加樣順序,加樣品時(shí)應(yīng)注意從zui高稀釋度逐一加至zui低稀釋度。


 

上海通蔚生物科技有限公司

上海通蔚生物科技有限公司

地址:上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號(hào)3463室

主營(yíng)產(chǎn)品:ELISA檢測(cè)試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

©2019 版權(quán)所有:上海通蔚生物科技有限公司  備案號(hào):滬ICP備14033764號(hào)-3  總訪(fǎng)問(wèn)量:1135457  站點(diǎn)地圖  技術(shù)支持:環(huán)保在線(xiàn)  管理登陸

望奎县| 山西省| 馆陶县| 茌平县| 若羌县| 余江县| 城固县| 樟树市| 濉溪县| 比如县| 民勤县| 土默特左旗| 友谊县| 丰城市| 荥阳市| 锡林郭勒盟| 连南| 临江市| 将乐县| 克山县| 柯坪县| 都江堰市| 曲松县| 松滋市| 新平| 海南省| 象山县| 礼泉县| 建瓯市| 桂林市| 临夏市| 仙居县| 陆良县| 文安县| 卓资县| 凤阳县| 浮梁县| 崇仁县| 卫辉市| 三门县| 娄烦县|